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中压制备色谱的多种分析方法探讨

 发布时间:2022-06-20 点击量:53
  中压制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等,比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱,其输液泵流速可达156mL/min,并配有阻尼器,以保证液流的稳定;进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管;检测器有紫外和示差折光检测器,流通池体积比较大,允许大流量流动相通过而无需分流;馏分收集器有原盘式和排式两种,原盘式的接收管多达80个,而后者则更多;色谱柱内径9-105mm,长度250-1760mm不等。
 
  对于一般中压制备色谱,当色谱柱直径较大时,柱头往往设计成锥形或有类似于伞状的液流导向结构,使得当大量样品进入到柱头上时,能迅速地分散到整个柱横截面上,及时被流动相冲走,避免了因样品的局部过浓而引起柱超负荷和谱带加宽。柱子填料则采用比较耐压的交联改性的多糖凝胶(如Sepharose CL,Superose等),聚合物微球,复合材料介质或硬质SiO2基体的化学键合相等,粒径一般在25~40um(常用的填料尺寸是15-25um,25-40um或40-63um),可采用湿法或干法装柱。
 
  中压制备色谱根据液相方法的流速和洗脱时间计算溶剂消耗量,装流动相的容器应清洁。含水流动相建议在实验前配制,并注意流动相的保质期。色谱柱都有一定的pH使用范围,流动相的pH应在色谱柱耐受的pH范围内。长时间停用或者更换流动相等,可能导致溶剂管路或溶剂泵被引入气泡,需要先排出气泡再进行实验。操作方法:打开溶剂泵的排空阀,开启溶剂泵的流速,排出溶剂管路和泵中气泡,直至排出的废液连续无间断,表明气泡已排干净。