对可重复使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold®高性能C18、C18Aq及C8色谱柱进行适当的预处理、清洗和储存,有助于延长柱子寿命并提高其一致性和可靠性。
在使用前,用六倍柱体积(CV)的1:1水:乙腈冲洗柱子。或者,通过柱子泵入两倍柱体积的100%乙腈,然后盖上盖子存放一小时后再使用。有关柱体积数据,请参见表1。
表1:色谱柱数据
样品负载能力
色谱柱上的样品负载应为柱介质重量的0.1%到2%。
运行后维护
在适当的维护下,RediSep C18色谱柱可以使用三十次或更多。反相方法应该编写成在分离结束时,用2-4倍柱体积(CV)的高比例(100%)有机溶剂(B溶剂)冲洗柱子。经过2-4 CV的冲洗后,可以将有机溶剂的比例恢复到初始条件并冲洗2-3 CV,以准备下一次运行的柱子平衡条件(见图1)。或者,可以将有机溶剂的比例改为80%,以便为色谱柱存储做准备。
图1. 运行后色谱柱冲洗
C18色谱柱可以长时间存储而不会损失性能。以下是反相C18色谱柱存储的一些通用规则:
• 一旦润湿后,切勿让反相色谱柱干燥。这将由于固定相的膨胀和收缩而导致通道效应。如果Flash色谱系统上有空气吹扫功能,应关闭该功能。
• 将色谱柱湿润并盖好,存储在含有10-30%水和70-90%有机溶剂(如乙腈、甲醇或乙醇)的环境中。
在使用前预处理色谱柱。用高比例(100%)有机溶剂清洁色谱柱。切勿让色谱柱干燥,并以70-90%有机溶剂湿润和盖好存储。